Procedimiento standard para trabajo con bromuro de etidio

Fecha de activación : 29 Octubre 2010
Aprobación por CSS: Pendiente

DATOS IDENTIFICATIVOS

Nº CAS: 1239-45-8
Nº CE: 214-984-6
Nº Anexo I: 612-278-00-6

Nombre de la sustancia:

• Bromure d'éthidium (francés)

• Bromuro di etidio (italiano)

• Bromek etydu (polaco)

• Ethidiumbromid (alemán)

• Ethidiumbromide(holandés)

• Ethidium bromide (ingles)

NOTA ACLARATORIA: La siguiente información es de carácter orientativo, no-exhaustivo. Se parte de la base de que las personas que manipulan productos químicos en laboratorio son peritas en el manejo de los mismos (Licenciados en C. Químicas, Biológicas, Bioquímica, Doctores, etc…) y son capaces de averiguar y por ende conocer las propiedades físico-químicas de las entidades químicas, sus incompatibilidades, y las particularidades y exigencias de seguridad de las operaciones básicas y procesos, etc…

1. Introducción

2. Utilización

3. Propiedades químicas

4. Propiedades toxicológicas

5. Precauciones de seguridad

6. Actuación en caso de emergencia

7. Actuación en caso de derrame

8. Procedimiento estandar de descontaminación

9. Otras consideraciones relevantes

 

1. INTRODUCCIÓN

El bromuro de etidio es un sólido rojo, un potente mutagénico de efecto acumulativo, es nocivo por ingestión, tóxico por inhalación e irritante para los ojos, la piel y las vías respiratorias; debe ser manipulado única y exclusivamente por personal capacitado.

Los efectos para la salud de las personas expuestas a este compuesto no han sido todavía investigados profundamente. Se sospecha que puede ser cancerígeno y teratogénico por su cualidad de mutagenicidad, aunque no hay ninguna prueba concluyente de ninguno de estos efectos. Si se ingiere, se inhala o se absorbe por la piel, esta sustancia puede tener efectos nocivos.

2. UTILIZACIÓN

El bromuro de etidio (BrEt) es un agente intercalante usado comúnmente como marcador de ácidos nucleicos en laboratorios de biología molecular para procesos como la electroforesis en gel de agarosa. Compuestos fluorescentes son formados por intercalación y estos compuestos se pueden ver por irradiación con luz ultravioleta.

3. PROPIEDADES QUÍMICAS

Aspecto: Cristales de color rojo oscuro.

Olor: Olor característico débil.

Solubilidad: 5 gramos en 100 gramos de agua.

Peso molecular: 394.33 g/mol

pH: 4 - 7 (solución del 2%)

% de los volátiles por el volumen a 21ºC: Ninguna información encontrada.

Punto de ebullición: No aplicable.

Punto de fusión: 238 – 240ºC

Densidad del vapor (Air=1): Ninguna información encontrada.

Presión de vapor: Ninguna información encontrada.

4. PROPIEDADES TOXICOLÓGICAS

Efectos potenciales para la salud:

Inhalación: El polvo es muy tóxico por la inhalación. La inhalación del polvo irrita las vías respiratorias.

Ingestión: Tóxico por ingestión.

Contacto de piel: Causa la irritación de la piel. Puede provocar la inflamación y/o la decoloración de la piel después del contacto. El contacto manchará la piel de color púrpura.

Contacto con los ojos: Provoca irritación, enrojecimiento y dolor ocular.

Exposición crónica: Puede provocar daños genéticos hereditarios (mutágeno).

Frases de riesgo:

R22: Nocivo por ingestión.

R26: Muy tóxico por inhalación.

R68: Posibilidad de efectos irreversibles.

5. PRECAUCIONES DE SEGURIDAD

Para trabajar con EtBr, los usuarios deberán estar previamente formados en los procedimientos de seguridad establecidos en cada laboratorio para la manipulación, descontaminación y eliminación de dicho agente químico. Se documentará la formación y adiestramiento del personal, así como la entrega de la ficha de datos de seguridad.

Como con el resto de productos químicos, se prohíbe comer o beber en las áreas en las que se manipula o almacena el EtBr.

Se recomienda la adquisición de las disoluciones existentes en el mercado que presenten las concentraciones más bajas de EtBr.

Vitrinas de gases

En estado sólido, sólo se podrá manipular dentro de vitrinas de gases plenamente operativas y eficaces desde el punto de vista de la protección que deben brindar al trabajador (frente a exposición a Contaminantes Químicos Aerotransportados -CQAE). Las vitrinas de gases tipo “estándar” garantizarán unos requisitos mínimos de emplazamiento, instalación y funcionamiento, que como mínimo serán: la ubicación de los puntos de descarga en las cubiertas de los edificios, adecuada compensación del aire extraído y verificación periódica de los caudales de extracción, teniendo en cuenta la naturaleza (peligrosidad) de la entidad química que se está vehiculando. En caso de duda razonable de la operatividad o eficacia del funcionamiento de la vitrina de gases se recomienda comunicarlo formalmente al Servicio Integrado de Prevención y Salud Laboral, a través del siguiente formulario electrónico: https://www.upv.es/pls/soalu/sic_frm.Formulario?P_ID=266516

En disolución, se podrá utilizar en entornos de trabajo bien ventilados con un sistema que garantice un mínimo de renovaciones/h, similar al referido para “laboratorios químicos”. Este área estará plenamente acondicionada para este fin (paredes y suelos lisos, mobiliario de material inerte, recipientes de recogida de residuos, material de limpieza y descontaminación, etc…). Nunca calentar las disoluciones por encima de los 55 ºC y conservar refrigerados (entre 2º y 8ºC)

Equipos de protección personal

En todo caso, el personal siempre utilizará, tanto en estado sólido como líquido, un conjunto de equipos de protección individual compuesto por: bata de laboratorio, calzado cerrado (preferiblemente lavable), guantes de caucho nitrilo (cambiar frecuentemente según las indicaciones del fabricante) y gafas de seguridad química (campo de uso 5).

Deberá lavarse las manos a fondo después de manipular el EtBr, una vez retirados los guantes para eliminar cualquier residuo que pueda haber entrado en contacto con la piel. El nitrilo es una barrera eficaz a corto plazo, por lo que deberán cambiarse según las indicaciones de cada fabricante o distribuidor de guantes.

Cuando se utilicen fuentes de radiación ultravioleta para visualizar el EtBr, el personal dispondrá de gafas de protección UV adecuadas al grado de protección necesario, según el tipo de emisión de la radiación utilizada.

Ducha y lavaojos de emergencia

Se dispondrá de estos dispositivos en las proximidades de las áreas de uso, perfectamente accesibles y periódicamente mantenidas.

Señalética:

En los laboratorios, o zonas concretas de los mismos en los que se trabaje con EtBr será necesario identificar, mediante algún elemento señalético, que se trabaja con dicha entidad química. Por poner un ejemplo, podría ser…

6. ACTUACIÓN EN CASO DE EMERGENCIA

En caso de contacto con los ojos: Lavar inmediatamente con abundante agua fría o fresca por lo menos durante 15 minutos. Posteriormente diríjase al médico.

En caso de contacto con la piel: Quite la ropa contaminada y lave inmediatamente el área afectada con el jabón y abundante agua fría durante al menos 15 minutos. Posteriormente diríjase al médico.

En caso de inhalación o ingestión de polvo: Saque a la víctima de la zona contaminada y diríjase inmediatamente al médico.

Nota: Después de cualquier exposición a EtBr (vía dérmica, inhalatoria, digestiva u ocular) póngase inmediatamente en contacto con el Gabinete Médico de la UPV (ext: 74072) o, en su caso, con el Servicio de Seguridad si fuese necesario trasladar al herido (ext: 78888). Acompañe al accidentado y facilite una copia de la Ficha de Seguridad al personal médico encargado de la prestación de los primeros auxilios.

7. ACTUACIÓN EN CASO DE DERRAME

Grandes derrames:

Avise al resto de personal que trabaje en el área en la que se ha producido el derramamiento. Evacue el laboratorio o el área afectada y comuníquelo inmediatamente al Servicio de Seguridad (ext: 78888).

Pequeños derrames:

Los pequeños derramamientos se pueden limpiar por el personal del propio laboratorio, siempre que estén adiestrados para actuar. No intervenga si no ha sido entrenado para proceder en caso de derrame.

Para poder actuar deberá asegúrese que se dispone de los kits de recogida de derrames (limpieza) y de los equipos de protección personal necesarios para actuar con seguridad, dependiendo del tamaño del derrame. El equipo estándar, para cualquier tipo de derrame, podría estar compuesto por: mono de protección química, botas lavables, guantes de caucho nitrilo, delantales impermeables, gafas de seguridad química y además protección respiratoria en caso de derrames sólidos (filtro FP3 para partículas sólidas).

Utilice una fuente de la luz UV para localizar el derrame o residuo. La fluorescencia de EtBr es fácil de identificar. Si el derramamiento es polvo, límpielo cuidadosamente con paños mojados y siga el procedimiento de descontaminación establecido en el laboratorio. Si el derramamiento de EtBr es líquido, absorba el líquido vertido con paños secos. A continuación proceda a la descontaminación del área.

8. PROCEDIMIENTO ESTANDAR DE DESCONTAMINACIÓN

Preparación de la disolución de descontaminación antes de su uso:

Reactivos: Nitrito de sodio (NaNO₂), Ácido hipofosforoso (H₃PO₂).

Procedimiento: Disolver en un frasco de vidrio 4,2 g de NaNO₂ en 20 ml de H₃PO₂ al 50% y enrazarlo con 300 ml de agua destilada. Verificar el pH el cual debe ser de 1,8. El volumen a preparar depende del tamaño de la superficie a descontaminar.

1. Lavar cinco veces las superficies con paños humedecidos con la solución de descontaminación. Utilizar un paño diferente cada vez que se realice el lavado.
2. Remojar por aproximadamente una hora cada uno de los paños utilizados en un recipiente conteniendo solución de descontaminación. Exprimir los trapos para extraer la solución sobrante.
3. Comprobar que no quedan restos de la presencia de EtBr en los paños y en las superficies afectadas utilizando una lámpara de luz ultra violeta. Repita el procedimiento de descontaminación cuanto sea necesario.
4. Eliminar la solución y los materiales de limpieza utilizados, según los procedimientos establecidos por el Área de Medio Ambiente de la UPV (Ext: 78956).

9. OTRAS CONSIDERACIONES RELEVANTES

En el supuesto de trabajadoras embarazadas se recomienda la suspensión temporal del trabajo con EtBr, durante todo el periodo de gestación, por tratarse de un producto químico especialmente peligrosos para la salud de la trabajadora y consecuentemente para el feto (aplicación del principio de precaución). Debiéndose garantizar, por parte de entidad en la que trabaje, la no exposición directa o indirecta a dicho producto durante todo el periodo de embarazo.